分光光度計(jì)是目前化驗(yàn)室中使用比較廣泛的一種分析儀器,其測(cè)定原理是利用物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收性,以較的單色光作為入射光,測(cè)定物質(zhì)對(duì)光的吸收,從而確定溶液中物質(zhì)的含量。在比色分析中,有色物質(zhì)溶液顏色的深度決定于入射光的強(qiáng)度、有色物質(zhì)溶液的濃度及液層的厚度。當(dāng)一束單色光照射溶液時(shí),入射光強(qiáng)度愈強(qiáng),溶液濃度愈大,液層厚度愈厚,溶液對(duì)光的吸收愈多,它們之間的關(guān)系,符合物質(zhì)對(duì)光吸收的定量定律。
1、在使用儀器前,必須仔細(xì)閱讀其使用說(shuō)明書(shū)。
2、若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng),需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新調(diào)零及滿(mǎn)度后,再測(cè)量。
3、指針式儀器在未接通電源時(shí),電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
4、操作人員不應(yīng)輕易觸動(dòng)燈泡及反光鏡燈,以免影響光效率。
5、放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。
6、比色皿使用時(shí)要注意其方向性,并應(yīng)配套使用,以延長(zhǎng)其使用壽命。新的比色皿使用前必須進(jìn)行配對(duì)選擇,測(cè)定其相對(duì)厚度,互相偏差不得超過(guò)2%透光度,否則影響測(cè)定結(jié)果。使用完畢后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈(測(cè)定有色溶液后,應(yīng)先用相應(yīng)的溶劑或(1+3)的硝酸進(jìn)行浸泡,浸泡時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),再用蒸餾水沖洗干凈),并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。
7、比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問(wèn)題。先,應(yīng)保證比色皿不傾斜。因?yàn)樯栽S傾斜,就會(huì)使參比樣品與待測(cè)樣品的吸收光徑長(zhǎng)度不一致,還有可能使入射光不能全部通過(guò)樣品池,導(dǎo)致測(cè)試準(zhǔn)確度不符合要求。其次,應(yīng)保證每次測(cè)試時(shí),比色皿架推拉到位。若不到位,將影響到測(cè)試值的重復(fù)性或準(zhǔn)確度。
8、干燥劑的使用問(wèn)題。干燥劑失效將會(huì)導(dǎo)致以下問(wèn)題:①數(shù)顯不穩(wěn),無(wú)法調(diào)零或滿(mǎn)度。②反射鏡發(fā)霉或沾污,影響光效率,雜散光增加。因此分光光度計(jì)應(yīng)放置在遠(yuǎn)離水池等濕度大的地方,并且干燥劑應(yīng)定期更換或烘烤。
9、分光光度計(jì)的放置位置應(yīng)符合以下條件:避免直射;避免強(qiáng)電場(chǎng);避免與較大功率的電器設(shè)備共電;避開(kāi)腐蝕性氣體等。